Возможно ты неосторожно установил программные биты, переводящие вход RESET микроконтроллера в дополнительную линию порта. Это обычно случается у новичков на последовательном программаторе. После такой "трепанации" интерфейс ISP отключается, ведь входа сброса RESET как таково уже не существует...